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    精密称取1，肉豆蔻酸适量置于10毫升容量瓶中，加甲醇稀释溶解，配制成1毫克毫升的内标储备液，4摄氏度保存。

    吸取内标储备液适量，加入甲醇稀释成浓度为5微克毫升的内标工作液。

    然后是样本前处理及衍生化反应。

    取50微升血清，加入200微升预冷的含1，2-13C2-肉豆蔻酸(5微克毫升)的甲醇溶液，涡旋3分钟，4摄氏度离心10分钟(14000r分钟)。

    同时，取上清液100微升置30摄氏度真空浓缩仪挥干2小时，加10毫克毫升甲氧胺吡啶30微升，涡旋5分钟，30摄氏度振荡1.5小时。

    继续加入30微升BSTFA，涡旋5分钟，37摄氏度振荡半小时，最后将样品4摄氏度离心10分钟，14000r分钟，取上清进样。

    最后，分析条件色谱条件:载气为氦气，流速1.2毫升分钟，采用分流进样，分流流速为24.0毫升分钟，分流比为20∶1。

    色谱柱:TG-5MS30m×0.25mm×0.25μm，进样口温度300摄氏度。

    升温程序:60摄氏度保持1分钟，以20摄氏度分钟升至320摄氏度，保持5分钟。

    质谱条件:EI电离源，电子能量为70eV，离子源温度为300摄氏度，传输线温度为300摄氏度。溶剂峰延迟时间为3.8分钟。

    采用全扫描模式，扫描范围mz50~500。

    各代谢物靶向定量测定采用选择反应监测(SRM)模式，碰撞气为高纯氩气(99.999%)。

    质谱参数优化吸取一定量的各代谢物的储备液和内标储备液进行混合，用甲醇稀释并挥干，采用衍生化条件进行衍生化并进样，采用全扫模式，对代谢物进行测定，确定各代谢物及内标的出峰时间。

    然后，我们再采用TSQ8000的AutoSRM分析模式自动优化质谱仪分析参数，优化后的各物质参数是……”

    “是什么？”杨光好奇又迫切地问道。

    　　


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